Elektroforees, mis see on, milleks see on ette nähtud ja kuidas seda tehakse

Elektroforees on laboratoorne tehnika, mille eesmärk on eraldada molekulid vastavalt nende suurusele ja elektrilaengule, et oleks võimalik diagnoosida haigused, kontrollida valkude ekspressiooni või tuvastada mikroorganisme.

Elektroforees on lihtne ja odav protseduur, mida kasutatakse laborirutiinis ja uurimisprojektides. Elektroforeesi eesmärgi kohaselt võib diagnoosi saamiseks olla vajalik teha muid teste ja eksameid, näiteks.

Milleks see mõeldud on

Elektroforeesi saab läbi viia erinevatel eesmärkidel, nii uurimisprojektides kui ka diagnoosimisel, kuna see on lihtne ja odav tehnika. Seega saab elektroforeesi teha:

• Tuvastage viirused, seened, bakterid ja parasiidid, kusjuures see rakendus on uurimisprojektides tavalisem;
• Isadustesti;
• Kontrollige valkude ekspressiooni;
• Tuvastage mutatsioonid, mis on kasulikud näiteks leukeemia diagnoosimisel;
• Analüüsige tsirkuleeriva hemoglobiini tüüpe, mis on kasulikud sirprakulise aneemia diagnoosimisel;
• Hinnake veres esinevate valkude kogust.

Elektroforeesi eesmärgi kohaselt võib diagnoosi lõpuleviimiseks olla vajalik, et arst teeks muid täiendavaid teste.

Kuidas seda tehakse

Elektroforeesi tegemiseks on vaja geeli, mis võib sõltuvalt objektiivist olla polüakrüülamiidist või agaroosist, elektroforeesipuhvrist ja vaadist, molekulmassi markerist ja fluorestsentsvärvist, lisaks UV- või LED-valgustitele, mida tuntakse ka transilluminaatorina..

Pärast geeli ettevalmistamist tuleb konkreetne ese asetada nii, et kaevud valmistataks geelis, mida rahvapäraselt nimetatakse kammiks, ja lasta geelil seista. Kui geel on valmis, kandke ained lihtsalt kaevudesse. Selleks tuleb ühte süvendisse asetada molekulmassi marker, positiivne kontroll, st teadaolev aine, negatiivne kontroll, mis tagab reaktsiooni kehtivuse, ja analüüsitavad proovid. Kõik proovid tuleb segada fluorestsentsvärviga, kuna sel viisil on võimalik ribasid visuaalselt läbi vaadata.

Geel koos proovidega tuleb asetada elektroforeesi vaadisse, mis sisaldab konkreetset puhverlahust, ja seejärel seade sisse lülitada, nii et tekiks elektrivool ja sellest tulenevalt potentsiaalide erinevus, mis on eraldamise jaoks oluline osakesed vastavalt nende koormusele ja suurusele. Elektroforeetilise tööaeg varieerub sõltuvalt protseduuri eesmärgist ja võib kesta kuni 1 tund.

Pärast kindlaksmääratud aega on võimalik läbi transilluminaatori vaadata elektroforeesi tulemusi. Kui geel asetatakse ultraviolettvalgust või LED-valgust, on võimalik visandada mustrimudel: mida suurem on molekul, seda väiksem on selle migratsioon, jõudes kaevule lähemale, samas kui kergem molekul, seda suurem on migratsioonipotentsiaal.

Reaktsiooni valideerimiseks on vaja, et positiivse kontrolli ribad oleksid visualiseeritud ja negatiivse kontrolli korral ei visualiseeritaks midagi, sest vastasel juhul on see märk saastumisest ja kogu protsessi tuleb korrata.

Elektroforeesi tüübid

Elektroforeesi saab läbi viia erinevatel eesmärkidel ja vastavalt selle otstarbele võib kasutada mitut tüüpi geeli, millest levinumad on polüakrüülamiid ja agaroos.

Elektroforeesi mikroorganismide tuvastamiseks tehakse sagedamini teaduslaborites, kuid diagnostilistel eesmärkidel saab elektroforeesi kasutada hematoloogiliste haiguste ja haiguste tuvastamiseks, mis arenevad koos valkude koguse suurenemisega, olles peamised elektroforeesi tüübid :

1. Hemoglobiini elektroforees

Hemoglobiini elektroforees on laboratoorne tehnika, mida kasutatakse veres ringlevate eri tüüpi hemoglobiini tuvastamiseks, mis võimaldab tuvastada hemoglobiini sünteesiga seotud haiguste esinemist. Hemoglobiini tüüp tuvastatakse elektroforeesi abil kindla pH juures, ideaaljuhul vahemikus 8,0 kuni 9,0, kontrollides ribade mustrit, mida saab võrrelda normaalse mustriga, võimaldades tuvastada ebanormaalsete hemoglobiinide olemasolu.

Milleks see on tehtud: Hemoglobiini elektroforees viiakse läbi hemoglobiinisünteesiga seotud haiguste, näiteks sirprakulise aneemia ja hemoglobiini C haiguse uurimiseks ja diagnoosimiseks, lisaks sellele, et see on kasulik talasseemia eristamiseks. Siit saate teada, kuidas tõlgendada hemoglobiini elektroforeesi.

2. Valgu elektroforees

Valgu elektroforees on arsti taotlusel eksam, et hinnata veres ringlevate valkude kogust ja seeläbi tuvastada haigusi. See test tehakse vereproovist, mida tsentrifuugitakse, et saada plasma - vereosa, mis koosneb muude ainete hulgas ka valkudest.

Pärast elektroforeesi saab visualiseerida ribade mustri ja seejärel graafiku, milles on näidatud valkude iga fraktsiooni kogus, mis on diagnoosimisel põhiline.

Milleks see on tehtud: Valgu elektroforees võimaldab arstil uurida hulgimüeloomi, dehüdratsiooni, tsirroosi, põletikku, maksahaigust, pankreatiiti, luupust ja hüpertensiooni esinemist ribavahemiku ja uuringuaruandes esitatud graafiku kohaselt.

Saate aru, kuidas seda tehakse ja kuidas mõista valgu elektroforeesi tulemust.